目前，商品化的色譜料粒度從1um到超過30um均有銷售，而目前分析分離主要用3um、5um和10um填料，填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù)，即柱效和背壓。粒度越小，填充柱的柱效越高；小于3um的填料應(yīng)用，在相同選擇性條件下，提高柱效可提高分離度，但不是唯一的因素。如果固定相選擇是正確，但是分離度不夠，那么選擇更小粒度的填料是很有用的，3um填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%；然而，3um的色相譜的背壓卻是5um的2倍。
與此同時，柱效提高意味著在相同條件下可以選擇更短的色譜柱，以縮短分析時間，另外，可以采用低粘度的溶劑做流動相或增加色譜柱的使用溫度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色譜柱的壓力。
高效液相色譜儀色譜柱
關(guān)于高效液相色譜儀如何保證良好的柱性能與柱壽命
◆ 過夜或貯存時，沖洗掉鹽和緩沖液，用純有機(jī)溶劑流動相保存（乙晴最好）。??
◆ 盡量減少壓力波動，避免機(jī)械及熱沖擊；??
◆ 認(rèn)證閱讀色譜柱使用說明書；
◆ 使用填充良好的色譜柱；
◆ 經(jīng)常以強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱；??
◆ 使用保護(hù)柱及在線過濾器；
◆ 用穩(wěn)定的固定相（C18最穩(wěn)定）；
◆ 充分過濾樣品及流動相，盡量避免雜質(zhì)微粒與強(qiáng)保留成分；
◆ 色譜柱使用溫度最好小于40℃；??
◆ 在中等PH值操作（6~8），用有機(jī)緩沖溶液；
◆ 流動相中含有緩沖溶液，應(yīng)注意應(yīng)95∶5的水及有機(jī)溶劑過渡，有機(jī)溶劑不能低于5%；??
◆ 硅膠基質(zhì)的的色譜柱，應(yīng)保持流動相的PH值范圍在3.0~8.0；
◆ 在水流動相與緩沖溶液中加200ppm的疊氮鈉；